Привет!
Помогите, пожалуйста, с одним этапом технологии:
Есть необходимость фракционировать содержимое клеток млекопитающего по моллекулярному весу, а точнее интересуют фракции свыше 200 кДа и ниже 250 Да.
Сейчас рассматривается вариант после гомогенизации клеток применить ультрацентрифугирование для осаждения обломков и органелл и предварительного грубого разделения моллекул по градиенту моллекулярного веса, отобрать верхнюю и нижнюю части супернатанта и отправить на гель-фильтрацию с разными сефадексами.
Загвоздка в том, чтобы подобрать режим ультрацентрифугирования чтобы осадить органеллы, а фракция 200кДа+ (Коллаген, фибронектин, гиалуроноваая кислота...) оказалась в нижней половине пробирки. Есть идеи как это можно рассчитать или может есть уже готовые обобщённые кривые распределения по массе при конкретном режиме центрифугирования?