Size: a a a

2020 June 01

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Самое интересное, что у других людей на этом же оборудовании всё работает, и у нас с другими праймерами на этой же ДНК тоже работает
А с этими нет
Хотя последовательности праймеров взяты из статьи, где показано, что все работает
Очень непонятно
источник

O

Orodret in Science FYI
Maria Ermolaeva
Самое интересное, что у других людей на этом же оборудовании всё работает, и у нас с другими праймерами на этой же ДНК тоже работает
А с этими нет
Хотя последовательности праймеров взяты из статьи, где показано, что все работает
Очень непонятно
А с этими праймерами уже работало?
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Orodret
А с этими праймерами уже работало?
Год назад работали
Потом стали похуже
А теперь вот совсем ничего
источник

А

Алиса in Science FYI
мгу так и не может бесплатно на курсере учиться? не знаете? @aozalevsky
источник

O

Orodret in Science FYI
Maria Ermolaeva
Год назад работали
Потом стали похуже
А теперь вот совсем ничего
Может праймеры того. Перезакажите на всякий
источник

O

Orodret in Science FYI
Тем более емли из одной аликвоты
источник

AD

Anton Dome in Science FYI
Статейные праймеры - дело такое. Сто тыщ раз убедитесь, что они точно ложатся куда надо, прежде чем заказывать
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Anton Dome
Статейные праймеры - дело такое. Сто тыщ раз убедитесь, что они точно ложатся куда надо, прежде чем заказывать
Вот похоже не проверили как раз
источник

AD

Anton Dome in Science FYI
Поставьте градиент температуры с этими праймерами. Так больше шансов поймать температуру, на которой будет хороший продукт
источник

AB

Alex Beliavskaia in Science FYI
Anton Dome
Статейные праймеры - дело такое. Сто тыщ раз убедитесь, что они точно ложатся куда надо, прежде чем заказывать
О да. 😑
источник

O

Orodret in Science FYI
Anton Dome
Поставьте градиент температуры с этими праймерами. Так больше шансов поймать температуру, на которой будет хороший продукт
Да, обычно в статьях и на практике температуры не совпадают
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Orodret
Да, обычно в статьях и на практике температуры не совпадают
Так ведь раньше работали
А сейчас перезаказали те же, и не работают они
источник

AB

Alex Beliavskaia in Science FYI
Orodret
Да, обычно в статьях и на практике температуры не совпадают
Температуры-то понятно, у всех разные машины, а вот иногда бывают криво подобранные по специфике
источник

AD

Anton Dome in Science FYI
Maria Ermolaeva
Так ведь раньше работали
А сейчас перезаказали те же, и не работают они
А вам олиги та же компания варила? Степень очистки какая?
источник

O

Orodret in Science FYI
Maria Ermolaeva
Так ведь раньше работали
А сейчас перезаказали те же, и не работают они
То есть это новая фасовка? Хм... еще могут при синтезе налажать...
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Anton Dome
А вам олиги та же компания варила? Степень очистки какая?
Да, та же компания (днк-синтез), от которой в первый раз все работало. Перезаказали, потому что уже много раз перезамораживали первую партию для реакций.
Очистка вроде минимальной степени, пааг
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Orodret
То есть это новая фасовка? Хм... еще могут при синтезе налажать...
Да, новая фасовка той же фирмы. Пока их косяк кажется наиболее вероятным объяснением
источник

AB

Alex Beliavskaia in Science FYI
А старая партия перестала работать или вы на всякий случай обновили?
источник

ME

Maria Ermolaeva in Science FYI
Alex Beliavskaia
А старая партия перестала работать или вы на всякий случай обновили?
Перестала работать, картина была такая же, как сейчас - неспецифика без продукта.
С другими праймерамина тех же реактивах ПЦР идёт нормально
источник

O

Orodret in Science FYI
Maria Ermolaeva
Перестала работать, картина была такая же, как сейчас - неспецифика без продукта.
С другими праймерамина тех же реактивах ПЦР идёт нормально
Тогда попробуйте температуру на градиенте поднять, если не поможет, пинайте контору
источник