Size: a a a

2019 November 14

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
каких срезах?
Сорян, клеток. Это ж препараты клеток для микроскопии?
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
Сорян, клеток. Это ж препараты клеток для микроскопии?
не, не для микроскопии. Для сингл селл секвенирования))
Я их мечу антителами с баркодами, чтобы потом все образцы слить в одну пробирку и секвенирование дешевле вышло. Но я протупила и при заготовке этого эксперимента бахнула клетки сразу в метанол, а теперь их надо из метанола доставать и антителами метить) И ещё надо решить, как делать в следующий раз -- сначала метить, а потом метанол, или наоборот
источник

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
не, не для микроскопии. Для сингл селл секвенирования))
Я их мечу антителами с баркодами, чтобы потом все образцы слить в одну пробирку и секвенирование дешевле вышло. Но я протупила и при заготовке этого эксперимента бахнула клетки сразу в метанол, а теперь их надо из метанола доставать и антителами метить) И ещё надо решить, как делать в следующий раз -- сначала метить, а потом метанол, или наоборот
Тут уже не принципиально, для чего, но насколько я знаю, чистые спирты смывают антитела. Поэтому после окраски антителами я бы через метанол не проводил. Хотя это наверное лучше знают люди, которые сингл-селл делали...
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
Тут уже не принципиально, для чего, но насколько я знаю, чистые спирты смывают антитела. Поэтому после окраски антителами я бы через метанол не проводил. Хотя это наверное лучше знают люди, которые сингл-селл делали...
я не нашла в интернетах упоминания процедуры, которую я пытаюсь сделать. Извращенка, видимо)
Спасибо за совет.
источник

PD

Paulina D in Science FYI
в смысле, не нашла упоминания комбинации процедур "мечение антителами"+"фиксация метанолом"
источник

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
в смысле, не нашла упоминания комбинации процедур "мечение антителами"+"фиксация метанолом"
А фиксация какую функциональную нагрузку несет?
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
А фиксация какую функциональную нагрузку несет?
1) обеспечить возможность делания эксперимента одной мной — там надо из клеточной культуры в разные дни отбирать клетки и ещё делать с оставшимися расти клетками некоторые штуки после отбора, и вот делать штуки + бросаться делать сингл селл библиотеку я не могу разорваться надвое, а делать штуки + шваркнуть отобранные клетки в метанол и на -80 ещё могу
2) удешевить приготовление сингл селл библиотеки, потому что там чип на несколько образцов одновременно, лучше накопить эти несколько образцов и прогнать их все разом
источник

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
1) обеспечить возможность делания эксперимента одной мной — там надо из клеточной культуры в разные дни отбирать клетки и ещё делать с оставшимися расти клетками некоторые штуки после отбора, и вот делать штуки + бросаться делать сингл селл библиотеку я не могу разорваться надвое, а делать штуки + шваркнуть отобранные клетки в метанол и на -80 ещё могу
2) удешевить приготовление сингл селл библиотеки, потому что там чип на несколько образцов одновременно, лучше накопить эти несколько образцов и прогнать их все разом
А сразу на -80 плохо?
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
А сразу на -80 плохо?
типа без метанола? Есть подозрение, что они охренеют и запустят шоковые транскрипционные программы, а я хочу померить транскрипцию максимально как она была, когда они были в тёпленькой плашке
источник

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
типа без метанола? Есть подозрение, что они охренеют и запустят шоковые транскрипционные программы, а я хочу померить транскрипцию максимально как она была, когда они были в тёпленькой плашке
Если в азот, то по идее клетки просто не успеют охренеть))
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
Если в азот, то по идее клетки просто не успеют охренеть))
а при разморозке не охренеют?) Или вы предлагаете их без дмсо в жидкий азот, сразу насмерть?
источник

V

Vladimir in Science FYI
Добрый день! Ищу специалиста по нейробиологии, хорошо разбирающегося во взаимодействии NMDA, ГАМК и ацетилхолиновых рецепторов, для помощи в решении практической задачи. Можно писать в личные сообщение. Также буду очень благодарен любым контактам, к кому можно обратиться.
источник

AP

Alexander Predeus in Science FYI
Комсомольский единый порыв. В Твиттер вообще лучше не заходить, там накал такой, что стальные лопасти гнутся
источник

AP

Alexander Predeus in Science FYI
Vasily Popkov
Какие-то они гомофобы и расисты. А где про геев то же? Про чёрных? Про индусов и китайцев?
С миноритями неудобно получается раз за разом. Делают квоту типа для "миноритиз" в школах престижных. Бац - и она вся заполнена индусами и китайцами, и так заботавших все лучше белых. А черные парни по-прежнему смотрят на движуху с непониманием, но общим пиететом )
источник

АШ

Алексей Шелкопряд🐛... in Science FYI
Alexander Predeus
Комсомольский единый порыв. В Твиттер вообще лучше не заходить, там накал такой, что стальные лопасти гнутся
Твиттер твиттером, а это nature.
источник

AP

Alexander Predeus in Science FYI
Алексей Шелкопряд🐛
Твиттер твиттером, а это nature.
Ну там тоже полно политоты всегда - вон, статьи от Кондрашова и Гельфанда были, как русских людей обижают, и очень много ещё всего.
источник

AP

Alexander Predeus in Science FYI
Нейча она же не только рисерч, там полжурнала публицистики
источник

O

Orodret in Science FYI
Paulina D
а при разморозке не охренеют?) Или вы предлагаете их без дмсо в жидкий азот, сразу насмерть?
Вам же их не высаживать после разморозки)) да, в жидкий азот, норм должны сохраниться. Хотя могут потом лизироваться, может это критично
источник

PD

Paulina D in Science FYI
Orodret
Вам же их не высаживать после разморозки)) да, в жидкий азот, норм должны сохраниться. Хотя могут потом лизироваться, может это критично
для сингл селла критично, да
источник

DA

Dmitry A in Science FYI
А через сайхаб можно как-то саплементы  выкачивать?
источник